Obtenir un échantillon de la première espèce de bactéries par écouvillonnage la colonie fermée avec une boucle stérile.
Comment utiliser les bactéries dans le génie génétique
Les bactéries sont des outils utiles dans la modification génétique. Grâce à l'utilisation de plasmides, des portions circulaires d'ADN bactérien interchangeable, organismes, tels que d'autres bactéries, peuvent être transformées génétiquement. Ce guide décrit les méthodes de base liés à l'utilisation des bactéries pour l'ingénierie génétique d'un autre organisme.
Choses que vous devez
- Espèces de bactéries non létales (de préférence une variante inoffensive de Escherichia coli)
- Deuxième espèces de bactéries non létales
- Boîte de Pétri
- Bactéries incubateur
- Les enzymes de restriction pour le gène cible
- 2 boucles stériles
- Bain d'eau chaude
- Test tube
Préparation du gène d'intérêt
- 1
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Agitez la boucle inoculé dans un tube à essai dans un bain d'eau à environ 48 degrés Celsius pendant cinq secondes.
- 3
Ajouter quelques millilitres d'enzyme de restriction pour le tube à essai et on chauffe, boucle inoculé. Cette enzyme de restriction varie en fonction du gène d'intérêt qui sera transférée aux autres espèces bactériennes.
Transformer les autres espèces de bactéries
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Tremper une seconde boucle stérile dans une colonie de la seconde espèce de bactéries, celui qui doit être transformée.
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Répartir les bactéries uniformément sur une boîte de Pétri contenant du milieu agarose en faisant glisser la boucle inoculé à travers le agarose.
- 3
Laissez les bactéries incuber pendant deux jours dans un incubateur, telles que les colonies bactériennes sont formés.
- 4
Ajouter le mélange créé précédemment contenant le gène d'intérêt de la boîte de Pétri contenant les colonies bactériennes.
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Laissez les bactéries incuber pendant deux jours dans l'incubateur. Cela permet à l'espèce à l'absorption des gènes ajoutés à l'antenne et les insérer dans leurs génomes.
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Concevoir une méthode pour tester les bactéries transformées pour voir si elles assimilées les gènes. Par exemple, si le gène ajouté accorde la résistance aux antibiotiques des bactéries, il peut être pratique d'ajouter des disques d'ampicilline à la plaque de gélose. Si ils survivent, ils ont pris le gène.
Conseils & Avertissements
- Lors du choix d'un gène à utiliser pour la transformation, pour choisir un gène qui peut être prélevée d'une autre bactérie facilement.
- Veillez également à choisir un gène qui peut être testé pour voir si la procédure a fonctionné. Par exemple, un gène qui rend les bactéries brillent est facilement vérifiable par la vue.
- Utilisez un soin extrême lorsque l'on travaille avec des bactéries, létales ou non létales.
- Se laver les mains avec un savon antibactérien avant, pendant et après tout travail avec des bactéries dans le génie génétique.
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